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2010-08-20
液相色譜法(HPLC)是20世紀(jì)60年代末70年代初發(fā)展起來(lái)的一種新型分離分析技術(shù),隨著不斷改進(jìn)與發(fā)展,目前已成為應(yīng)用極為廣泛的化學(xué)分離分析的重要手段。它是在經(jīng)典液相色譜基礎(chǔ)上,引入了氣相色譜的理論,在技術(shù)上采用了高壓泵、固定相和高靈敏度檢測(cè)器,因而具備速度快、效率高、靈敏度高、操作自動(dòng)化的特點(diǎn)。為了更好地了解液相色譜法*性,現(xiàn)從兩方面進(jìn)行比較:
1.液相色譜法與經(jīng)典液相色譜法
液相色譜法比起經(jīng)典液相色譜法的更大優(yōu)點(diǎn)在于高速、、高靈敏度、高自動(dòng)化。高速是指在分析速度上比經(jīng)典液相色譜法快數(shù)百倍。由于經(jīng)典色譜是重力加料,流出速度極慢;而液相色譜配備了高壓輸液設(shè)備,流速更高可達(dá) 103cm·min-1.例如分離苯的羥基化合物,7個(gè)組分只需1min就可完成。對(duì)氨基酸分離,用經(jīng)典色譜法,柱長(zhǎng)約170cm,柱徑0.9cm,流動(dòng)相速度為30cm3·h-1,需用20多小時(shí)才能分離出20種氨基酸;而用液相色譜法,只需lh之內(nèi)即可完成。又如用25cm×0.46cm的Lichrosorb-ODS(5μ)的柱,采用梯度洗脫,可在不到0.5h內(nèi)分離出尿中104個(gè)組分.
2.液相色譜法與氣相色譜法
(l)氣相色譜法分析對(duì)象只限于分析氣體和沸點(diǎn)較低的化合物,它們僅占有機(jī)物總數(shù)的20%。對(duì)于占有機(jī)物總數(shù)近80%的那些高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、摩爾質(zhì)量大的物質(zhì),目前主要采用液相色譜法進(jìn)行分離和分析。
(2)氣相色譜采用流動(dòng)相是惰性氣體,它對(duì)組分沒(méi)有親和力,即不產(chǎn)生相互作用力,僅起運(yùn)載作用。而液相色譜法中流動(dòng)相可選用不同極性的液體,選擇余地大,它對(duì)組分可產(chǎn)生一定親和力,并參與固定相對(duì)組分作用的劇烈競(jìng)爭(zhēng)。因此,流動(dòng)相對(duì)分離起很大作用,相當(dāng)于增加了一個(gè)控制和改進(jìn)分離條件的參數(shù),這為選擇更佳分離條件提供了極大方便。
(3)氣相色譜一般都在較高溫度下進(jìn)行的,而液相色譜法則經(jīng)??稍谑覝貤l件下工作。
總之,液相色譜法是吸取了氣相色譜與經(jīng)典液相色譜優(yōu)點(diǎn),并用現(xiàn)代化手段加以改進(jìn),因此得到迅猛的發(fā)展。目前液相色譜法已被廣泛應(yīng)用于分析對(duì)生物學(xué)和醫(yī)藥上有重大意義的大分子物質(zhì),例如蛋白質(zhì)、核酸、氨基酸、多糖類(lèi)、植物色素、高聚物、染料及藥物等物質(zhì)的分離和分析。
液相色譜法的儀器設(shè)備費(fèi)用昂貴,操作嚴(yán)格,這是它的主要缺點(diǎn)。
杭州瑞析科技有限公司主要供應(yīng):液相色譜儀|液相色譜儀報(bào)價(jià)|島津自動(dòng)進(jìn)樣器SIL-10ADvp|氣相色譜儀|便攜式氣相色譜儀
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