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液相色譜儀一般由溶劑輸送系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)（色譜柱）、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理與記錄系統(tǒng)組成，具體包括儲(chǔ)液器、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀或數(shù)據(jù)工作站等幾部分[1]。其中輸液泵、色譜柱和檢測(cè)器是HPLC儀的關(guān)鍵部分。

液相色譜儀結(jié)構(gòu)

1.溶劑輸送系統(tǒng)

儲(chǔ)液器：用來(lái)貯存數(shù)量足夠、符合要求的流動(dòng)相。配有溶劑過(guò)濾器，以防止流動(dòng)相中的顆粒進(jìn)入泵內(nèi)。

脫氣器：脫氣的目的是為了防止流動(dòng)相從色譜柱內(nèi)流出時(shí)釋放出氣泡進(jìn)入檢測(cè)器，從而引起噪聲，不能正常檢測(cè)。

輸液泵：將儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相連續(xù)不斷地以高壓形式進(jìn)入液路系統(tǒng)，使樣品在色譜柱中完成分離過(guò)程。

梯度洗脫裝置：是在分離過(guò)程中通過(guò)逐漸改變流動(dòng)相的組成增加洗脫能力的一種裝置。

2.進(jìn)樣系統(tǒng)

進(jìn)樣器：是將樣品送入色譜柱的裝置，進(jìn)樣方式可以分為兩種：閥進(jìn)樣或自動(dòng)進(jìn)樣。比較常用的是采用自動(dòng)進(jìn)樣器裝樣。

3.分離系統(tǒng)

色譜柱：對(duì)樣品進(jìn)行分離，是整個(gè)色譜系統(tǒng)的心臟，它的質(zhì)量?jī)?yōu)劣直接影響到分離的效果。

4.檢測(cè)系統(tǒng)

檢測(cè)器：將色譜柱連續(xù)流出的樣品組分轉(zhuǎn)變成易于測(cè)量的電信號(hào)，被數(shù)據(jù)系統(tǒng)接收，得到樣品分離的色譜圖。

5.數(shù)據(jù)處理和記錄系統(tǒng)

對(duì)色譜數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，并參與HPLC儀器的自動(dòng)控制

液相色譜儀發(fā)展歷史

1960年代，由于氣相色譜對(duì)高沸點(diǎn)有機(jī)物分析的局限性，為了分離蛋白質(zhì)、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì)，氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜。1960年代末科克蘭（Kirkland）、哈伯、荷瓦斯（Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發(fā)了世界上臺(tái)液相色譜儀，開啟了液相色譜的時(shí)代。液相色譜使用粒徑更細(xì)的固定相填充色譜柱，提高色譜柱的塔板數(shù)，以高壓驅(qū)動(dòng)流動(dòng)相，使得經(jīng)典液相色譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的分離工作得以在幾個(gè)小時(shí)甚至幾十分鐘內(nèi)完成。

1971年科克蘭等人出版了《液相色譜的現(xiàn)代實(shí)踐》一書，標(biāo)志著液相色譜法(HPLC）正式建立。在此后的時(shí)間里，液相色譜成為為常用的分離和檢測(cè)手段，在有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥物開發(fā)與檢測(cè)、化工、食品科學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)、商檢和法檢等方面都有廣泛的應(yīng)用。液相色譜同時(shí)還極大的刺激了固定相材料、檢測(cè)技術(shù)、數(shù)據(jù)處理技術(shù)以及色譜理論的發(fā)展。

1960年代前，使用的填充粒大于100μm，提高柱效面臨著困境，后來(lái)的研究人員便采用微粒固定相來(lái)突破著一瓶頸。