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2019-04-23
液相色譜儀色譜法原理就是在原基礎(chǔ)上的色譜法上引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)方面上,流動相改為高壓輸送到高壓力,可達到4.9′107Pa。色譜柱則是用特殊的方式用小顆粒裝填而成。造成的結(jié)果就是色譜柱的柱效遠遠高于原始的經(jīng)典液相色譜。并且它柱子使用后還能具有高度靈敏度檢測器。能夠?qū)α鞒鰜淼姆治鑫镞M行連續(xù)檢測。下面就跟瑞析科技小編一起來看看液相色譜儀的原理及應(yīng)用吧!
通俗來講就是:多年前大學(xué)老師講的,至今認為是形象的對“色譜”的描述—講一群女孩子去逛街,街上店鋪林立,但是每個女孩子都有自己不同的喜好于是有的進了這家,有的進了那家,后大家越走越分散,所以有的先走出這條街,有的后走出來—女孩子指化合物,這條街是色譜柱。店鋪是固定相,推著化合物走得是流動相,提供動力的是泵,后站在街尾數(shù)人數(shù)認人的是檢測器。認人帶著照片啥的是標(biāo)準(zhǔn)品,認出來走到倒數(shù)第二個的女孩就是你朝思暮想的那位。就可以定義或定量分析了。 不知道你聽明白沒?這就液相色譜的原理。
液相色譜儀的應(yīng)用
1.液相色譜儀在食品安全領(lǐng)域的應(yīng)用
食品添加劑的檢測
食品添加劑主要常用的有三類:分別是防腐劑、甜味劑和色素。添加劑的檢測方法多種多樣,例如氣象法,比色法等,但是液相色譜法的優(yōu)勢非常明顯,故現(xiàn)代檢測技術(shù)中,多偏向于使用液相色譜法來檢測。 在防腐劑檢測方面,駱和東等[5] 用Hypersil ODS色譜柱,流動相為0.02mol/L pH5.0乙酸銨甲醇溶液,柱溫35℃,在不同波長下同時測定苯甲酸和山梨酸。 在合成色素的檢測方面,吳敏[6]等采用Zorbax 80A Extend—C8色譜柱,液相色譜儀配備紫外檢測器,同時測定食品中對位紅和等8種脂溶性燃料。 近幾年隨著色譜柱填充制備技術(shù)的高速發(fā)展,已經(jīng)可以一次性分離糖精鈉、安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸、檸檬黃、莧菜紅、亮藍這十種食品常用添加劑。其效率之高非其他儀器分析方法可比。
食品中危害物質(zhì)的檢測
食品中有害物質(zhì)主要可分為:農(nóng)藥、獸藥殘留;霉菌毒素;重金屬;加工過程中高溫或其它特殊條件下形成的致癌物質(zhì)等。 黃曲霉毒素普遍存在于多種谷物類食品當(dāng)中,具有*的致畸致癌作用,王君[7] 等用HyPersil ODS—C18色譜柱,測定食品中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2含量,該方法方便快捷,定性準(zhǔn)確,較傳統(tǒng)的點板法,酶聯(lián)免疫吸附法更為科學(xué)準(zhǔn)確。 液相色譜法在應(yīng)對2008年奶粉摻入三聚氰胺風(fēng)波的檢測中發(fā)揮了重要作用,面對全國眾多乳制品企業(yè)的樣品進行檢測,盡快出具檢測結(jié)果給老百姓一個公正準(zhǔn)確的結(jié)果,檢測方法必須既要快,又要準(zhǔn),檢出量還非常微小,能做到完成這一任務(wù)的,僅有液相色譜法能夠做到。目前檢測三聚氰胺的方法主要有液相色譜法、酶聯(lián)免疫法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法。其中液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法由于能夠快速地對三聚氰胺定性與定量,已成為大家的檢測方法
2.液相色譜儀在工業(yè)上的應(yīng)用
以往,在石油化工、農(nóng)藥、環(huán)保等方面,經(jīng)常采用薄層色譜法(TLC)和氣相色譜法(OC)進行含量測定,而液相色譜法(LC)只是用于對組分標(biāo)樣的測定和分離的可能性的研究。 自七十年代以來,我國就有數(shù)家科研部門以及工廠前后研制并生產(chǎn)了液相色譜儀。LC開始在我國許多科學(xué)領(lǐng)域進入了實用階段,尤其是對那些熱穩(wěn)定性差或蒸氣壓低的樣品組分的分析,更顯示了LC的*性[8] 。 近幾年來,HPLC在油品分析,尤其是在石油中多環(huán)芳烴、重質(zhì)烴的測定方面取得了突破性的進展。茍愛仙等[9] 以正己烷、二氯甲烷為流動相,用多維液相色譜技術(shù)及適宜的梯度淋洗條件,實現(xiàn)了渣油各烴族良好的分離和檢測。呂振波等 [10] 同樣用HPLC對潤滑油基 礎(chǔ)油的化學(xué)族組成進行了分離分析,以鍵合氰基柱和硅膠柱雙柱切換的方式,正己烷為流動相,示差折光檢測器檢測,得到了不同產(chǎn)地和餾程的基礎(chǔ)油烴類的族組成。
3.液相色譜儀在生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用
生命科學(xué)研究工作中,大的難題就是基因的解密工作,從基因組DNA序列尚不能回答某基因的表達時間、表達量、蛋白質(zhì)翻譯后加工和修飾的情況、以及它們的亞細胞分布等等。這些在基因組中不能解決的問題可望在蛋白質(zhì)組學(xué)(Proteome)研究中找到答案。在所研究的細胞中會有3~5萬種功能各異的蛋白質(zhì),目前蛋白質(zhì)組研究所使用的雙向電泳法一般只能分辨到2000~3000個蛋白質(zhì)點?,F(xiàn)代蛋白質(zhì)組的分析可嘗試使用向是體積排阻色譜的雙向HPLC液相色譜作預(yù)分離。液相色譜和雙向電泳將會成為蛋白質(zhì)組學(xué)的重要分離工具。因此,液相色譜儀將為深入地揭示生命奧秘作出更大的貢獻。
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